ОБОСНОВАНИЕ ВЫБОРА МЕТОДА И МАТЕРИАЛА ДЛЯ ИММОБИЛИЗАЦИИ ФЕРМЕНТОВ

В статье приведены исследования по разработке тест-системы по определению фосфорорганических соединений в молоке на основании проведенных исследований нами выбран гидролитический фермент с наиболее высокой удельной активностью, и соответственно, проявляющий высокую чувствительность к ингибирующим свойствам карбофоса в молоке, а именно, ацетилхолинэстераза.
Основой для создания экспресс-методов определения пестицидов являются физикохимические, микробиологические, биохимические, молекулярно-биологические и иммунологические способы и они постоянно совершенствуются.
В статье были применены теоретические и экспериментальные исследования. Экспериментальные исследования были проведены на основе общепринятых, модифицированных и стандартных методов исследований физико-химических, органолептических, реологических, гигиенических показателей безопасности объектов исследований, а также удельной активности ферментов.
Поскольку, молоко является сложной полидисперсной системой, то важным фактором является выбор фермента с более высокой удельной активностью. По данным литературных источников гидролитические ферменты (ацетилхолинэстеразы и бутирилхолинэстеразы) обладают высокой чувствительностью к ингибирующим свойствам карбофоса, которая проявляется в понижении удельной активности фермента. Результаты проведенных экспериментальных исследований показали, что из двух гидролитических ферментов наибольшую удельную активность показывает ацетилхолинэстераза в сравнении с бутирилхолинэстеразой как в водной среде, так и в молоке.
Исходя из результатов исследования, можно отметить, что при оптимальной температуре гелеобразования 18-20ºС максимальную активность ацетилхолинэстераза проявляет при оптимальной величине рН среды для полимерного геля, полученного на основе желатина 6,1; для среды для полимерного геля, полученного на основе альгината натрия – 5,4.

1. Полимерные носители для иммобилизации ферментов / А.Г. Аракелян и др. // Проблемы науки. – 2018. – № 11(35). – С. 9-10.

2. Демьянцева Е.Ю. Способы инкапсулирования ферментов: учеб.-метод. пос. / Е.Ю. Демьянцева, А.В. Парфенова/ – СПб., 2018. – 20 с.

3. Спектрофотометрический метод определения протеолотической активности иммобилизованных в структуру биополимеров / Е.В. Волосова и др. // Успехи современного естествознания. – 2016. – № 4. – С. 18-22.

4. Клюева М.В. Основные аспекты иммобилизации ферментов на примере липаз / М.В. Клюева // Молодой ученый. – 2014. – № 8. – С. 320-325.

5. Ефимцева Э.А. Иммобилизация щелочнойфосфотазы. Перспективы биомедицинского использования иммобилизованного фермента / Э.А. Ефимцева, Т.И. Челпанова // Биотехнология. – 2017. – Т. 33, № 4. – С. 54-75.

6. Методы функционализации поверхности сенсоров биологическими молекулами / Н.Е. Маслова и др. // Молекулярная медицина. – 2013. – № 5. – С. 8-15.

7. Приворотская Е.А. Получение стабилизированных форм гидролитических ферментов технического и фармацевтического назначения: дис. … канд. хим. наук: 03.01.06. – М., 2017. – 171 с.

8. Мазеина Г.С. Разработка новых защитных групп для бороновых кислот на основе борадамантов / Г.С. Мазеина, А.Ю. Сухороков // Успехи в химии и в химической технологии. – 2017. – Т. 31, № 4. – С. 13-15.

9. Челпанова Т.И. Иммобилизация щелочнойфосфотазы на сферических пектиновых гелях / Т.И. Челпанова, Э.А. Ефимцева // Прикладная биохимия и микробиология. – 2016. – Т. 52, № 1. – С. 44-52.

10. Water Contamination through Pesticide and Their Toxic Effect on Human Health / M.S. Sankhla et al // International Journal for Research in Appliet Science and Engneering Technology. – 2018. – Vol. 6. – P. 967-970.

11. Effective removal of different species of organophosphorus pesticides (acephate, omthosate, and methyl parathion) using chitosan/Zeolite-A as multifunctional adsorbent / M. Mostafa et al // Environmental Technology & Innovation. – 2021. – Vol. 24. – P. 101875.