СКРИНИНГ ШТАММОВ, ПРОДУЦИРУЮЩИХ КСИЛАНАЗУ, И ЕГО ПРИМЕНЕНИЕ ПРИ ФЕРМЕНТАЦИИ ВЫСУШЕННЫХ В ДЫМОХОДЕ ТАБАЧНЫХ ЛИСТЬЕВ

В ходе этого экспериментального исследования был выведен штамм, продуцирующий ксиланазу, выделенную из табачного листа. С помощью основного метода скрининга штаммов и определения активности ксиланазы был предварительно идентифицирован штамм M416 с наивысшей ферментативной активностью, и M416 был A. niger, фермент обладает биологической безопасностью и может быть использован в процессе ферментации табака, высушенного в дымоходе. Условия ферментации были оптимизированы путем встряхивания культуры в колбе, в результате чего была получена наилучшая рецептура производства ксиланазы из A. были получены niger и оптимальная температура культивирования, рН, количество инокулята и время культивирования. При оптимальных условиях ферментации и получения аромата штамм равномерно распыляют на поверхность табачного листа, чтобы определить изменения состава и содержания ароматических веществ в процессе ферментации и оценить влияние ксиланазы, продуцирующей нигер, на ароматическую композицию в процессе ферментации табачного листа, что показывает, что штамм может эффективно увеличивать содержание ароматических веществ.

1. Sharma A.K., Sharma M.K. Plants as bioreactors: Recent developments and emerging opportunities / A.K. Sharma, M.K. Sharma // Biotechnol Adv. – 2009. – № 27(6). – Р. 811-832. DOI: https://doi.org/10.1016/j.biotechadv.2009.06.004.

2. Prade R.A. Xylanases: from biology to biotechnology / R.A. Prade // Biotechnol Genet Eng Rev. – 1996. – № 13. – Р. 101-131. DOI: https://doi.org/10.1080/02648725.1996.10647925.

3. Omogbenigun F.O. Dietary supplementation with multienzyme preparations improves nutrient utilization and growth performance in weaned pigs / F.O. Omogbenigun, C.M. Nyachoti, B.A. Slominski // J Anim Sci. – 2004. – № 82(4). – Р. 1053-1061. DOI: https://doi.org/10.2527/2004.8241053x.

4. The expression of a xylanase targeted to ER-protein bodies provides a simple strategy to produce active insoluble enzyme polymers in tobacco plants / I. Llop-Tous et al // PLoS One. – 2011. – № 6(4). – Р. 19474. DOI: https://doi.org/10.1371/journal.pone.0019474.

5. Herbers K. Thermostable Xylanase from Clostridium thermocellum Expressed at High Levels in the Apoplast of Transgenic Tobacco Has No Detrimental Effects and Is Easily Purified / K. Herbers, I. Wilke, U.A. Sonnewald // Bio/technology. – 1995. – № 13(1). – Р. 63-66. DOI: https://doi.org/10.1038/nbt0195-63.

6. Production of Recombinant Proteins in Tobacco Guttation Fluid / S. Komarnytsky et al // Plant physiology. – 2000. – № 124(3). – Р. 927-934. DOI: https://doi.org/10.1104/pp.124.3.927.

7. Production of recombinant proteins in plant root exudates / N.V. Borisjuk et al // Nature Biotechnology. – 1999. – № 17(5). – Р. 466-469.

8. Herbers K. Apoplastic expression of the xylanase and β(1-3, 1-4) glucanase domains of the xyn D gene from Ruminococcus flavefaciens leads to functional polypeptides in transgenic tobacco plants / K. Herbers, H.J. Flint, U. Sonnewald // Molecular Breeding. – 1996. – № 2(1). – Р. 81-87. DOI: https://doi.org/10.1007/BF00171354.

9. High expression of the xylanase B gene from Clostridium stercorarium in tobacco cells / J. Sun et al // Journal of Fermentation & Bioengineering. – 1997. – № 84(3). – Р. 219-223. DOI: https://doi.org/10.1016/S0922-338X(97)82057-0.

10. Patent US6137032 United States. Xylanase obtained from an anaerobic fungus / K.J. Cheng, L.B. Selinger, J.H. Liu et al; Application filed by Agriculture and Agri Food Canada AAFC – US09/390,200 events; 07.09.99; 24.10.00. – 25 р.

11. Transgenic barley expressing a fungal xylanase gene in the endosperm of the developing grains / M. Patel et al // Molecular Breeding. – 2000. – № 6(1). – Р. 113-124. DOI: https://doi.org/10.1023/A:1009640427515.

12. Molecular breeding of transgenic rice expressing a xylanase domain of the xynA gene from Clostridium thermocellum / T. Kimura et al // Applied Microbiology and Biotechnology. – 2003. – № 62(4). – Р. 374-379. DOI: https://doi.org/10.1007/s00253-003-1301-z.

13. Isolation and identification of xylanase-producing strains during tobacco fermentation / FAN YiWen et al // Modern Food Science and Technology. – 2013. – № 029(011). – Р. 2658-2662.

14. GUO Qingji Screening of xylanase-producing bacteria, enzyme properties and construction and screening of macrogenomic library / GUO Qingji // Qingdao University of Science and Technology, 2008. DOI: https://doi.org/10.7666/d.y1399894.